越来越多的科研人员用预制胶代替手动灌胶

首先来跟大家普及一下什么叫预制胶。
预制胶,顾名思义,就是厂家预先制备好的凝胶。预制胶的好处在于,打开包装就能用,点上样本就能跑,可以大大加快了实验进程,同时也让您远离繁琐的操作和有毒的试剂,不再为漏胶等问题而烦恼。
 
预制胶给很多科研人员带来更佳的体验感受,原因在于:预制胶的成分更均一,批间差异小,最终的数据将体现出更高的一致性和重复性;同时,与手动灌胶相比,预制胶分离的蛋白条带更加锐利,分辨率也更高,能够获得更漂亮的电泳结果。预制胶还有一个优势在于,保质期长。自制的凝胶大约只能保存一周,而预制胶能保存数个月,甚至一年。
 
如今,越来越多的研究人员开始使用非变性凝胶。与变性凝胶相比,不含SDS的非变性凝胶体系在分离蛋白的同时,能够保留其天然的结构,从而可用于蛋白质之间相互作用的研究,以及蛋白质复合物的分离和分析。
 
NativePAGE Bis-Tris非变性蛋白预制胶它是基于Blue-Native PAGE的原理,让考马斯亮蓝G-250附着在蛋白上使其带有负电荷,同时保持蛋白质的天然状态,不会使其变性。在上样前将G-250添加于含有非离子型表面活性剂的蛋白样本中,可以让蛋白带上负电荷;同时G-250也会加于阴极缓冲液中为凝胶提供持续的G-250供给,传统的非变性电泳大多采用Tris-甘氨酸系统,其工作pH较高(9.3-9.5),会对在高pH条件下敏感的蛋白质带来不利影响,相比之下,NativePAGE Bis-Tris预制胶的工作pH接近中性(7.5-7.7),有助于保持蛋白质的天然结构和对高pH值敏感的蛋白质的活性。同时,由于传统的Tris-甘氨酸非变性电泳系统主要利用工作pH高于蛋白质等电点而使其带上负电荷后进行电泳,因此不适用于等电点高于电泳工作pH的蛋白质。而NativePAGE利用考马斯亮蓝G-250使蛋白质在非变性条件下带负电,并在近中性工作pH下进行电泳,因此无需再考虑蛋白的等电点造成的限制。
 
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