AEC底物显色试剂盒的操作步骤及注意事项


AEC底物显色试剂盒使用方法:(仅供参考)
1.工作液配制:
取850ul无菌双蒸水,依次加入50ul溶液A、50 ul溶液B、50ul溶液C、混合均匀,即配成AEC工作液。如需要更大体积工作液,可按相应比例放大。此溶液必须现用现配,配好后避光保存,半小时内使用,过期后请将剩余的液体废弃。
2.显色:
1)蛋白质印迹膜显色:将配制好的工作液滴加在印迹膜上(或将印迹膜浸入AEC工作液中),显色时间一般为10-30min。显色完毕后,将膜浸入蒸馏水中,终止反应。
2)组织切片染色:向组织切片上加入适量AEC工作液,确保能充分覆盖样品。室温孵育10-30 min,避免光照,直至显色至预期深浅。可在显微镜下观察控制显色时间。显色后用蒸馏水洗涤即可终止显色反应。
3)对于组织切片或细胞样品,显色反应终止后,可对其进行其他染料复染。对于膜,显色反应终止后,可以室温晾干避光保存。
AEC底物显色试剂盒注意事项:
由于AEC生成的颜色产物为脂溶性,因此用于IHC显色后不适合梯度酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片,须用水性封片剂封片。
根据情况自行优化实验条件,调整显色时间,获得最佳显色效果。
AEC有一定毒性,操作时请采取必要的防护措施。
 
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